IF 19.1！浙大一院章京/彭国平团队在TRANSL NEURODEGENER发文：HSPA8有望成为阿尔茨海默病干预新靶点

论文标题：HSPA8 orchestrates SNARE complex assembly to drive extracellular vesicle-mediated spread of p-tau217 in Alzheimer’s disease

发表期刊：Translational Neurodegeneration（IF 19.1）

合作客户：浙江大学医学院附属第一医院 章京、彭国平教授团队

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研究背景

阿尔茨海默病（AD）患者血浆中游离形式的p-tau217升高，但p-tau217阳性的细胞外囊泡（EVs）比例却降低——这一矛盾现象提示AD中存在EV的异常调控机制。2026年8月，浙江大学医学院附属第一医院章京/彭国平教授团队在Translational Neurodegeneration（IF 19.1）期刊发表题为HSPA8 orchestrates SNARE complex assembly to drive extracellular vesicle-mediated spread of p-tau217 in Alzheimer’s disease的研究论文，揭示了HSPA8在调节多囊泡体（MVBs）介导的EV释放和tau蛋白传播中的作用，并突出了HSPA8作为改变AD进展的有希望的治疗靶点。

研究结果

1、p-tau217⁺EV合成/分泌减少

研究团队证实了AD患者脑脊液、血浆中游离p-tau217显著高于健康对照，重现“游离p-tau217升高、p-tau217⁺EV下降”这一矛盾现象。随后构建体外三细胞共培养血脑屏障（BBB）模型，发现经Aβ42处理损伤后的BBB，EV穿过屏障的比例反而更高，提示外周血p-tau217⁺EV减少并非由于胞外囊泡从中枢向外周的跨血脑屏障转运受损造成。Aβ42处理SH-SY5Y细胞后，细胞内p-tau217发生蓄积；溶酶体降解能力下降，但p-tau217⁺EV的合成与分泌受损更加突出，提示分泌缺陷是囊泡减少的主因，而非降解异常。此外，Aβ42处理未引起显著的细胞活力下降或细胞毒性，但引发了突触损伤。细胞上清的纳米流式检测证实p-tau217⁺EV分泌量明显下降。通过分析Aβ42处理的SH-SY5Y细胞中的多个磷酸化位点，证明是特定磷酸化tau亚型的选择性囊泡包装分泌受损，并非总tau表达改变。APP/PS1小鼠体内验证中，12月龄老年AD小鼠血浆游离p-tau217升高，p-tau217⁺EV比例显著降低；3月龄幼龄小鼠尚无该改变，符合AD年龄依赖性病理特征。结合上述体外、体内实验表明神经元p-tau217⁺EV合成、分泌能力受损，导致外周p-tau217⁺EV减少，胞内p-tau217堆积。

Aβ42处理的细胞或APP/PS1小鼠中p-tau217和p-tau217⁺EV的水平

2、HSPA8调节SNARE复合物和p-tau217⁺EV的分泌

研究团队对AD患者脑脊液中免疫捕获的p-tau217⁺EV开展质谱蛋白质组分析，经GO、KEGG、PPI互作网络筛选得到核心Hub基因。利用tau-T217磷酸化/去磷酸化模拟突变，区分上下游分子，发现包含HSPA8在内的多个基因不受p-tau217磷酸化状态调控，可能起上游调节作用。在这些基因中，HSPA8已被报道调节SNARE复合体功能，其介导囊泡的合成和分泌。研究团队发现Aβ42处理后SH-SY5Y细胞HSPA8蛋白表达上调；人海马空间转录组数据证实AD患者海马HSPA8基因表达同样升高。构建HSPA8 shRNA敲低模型，纳米流式结果显示Aβ42处理会造成p-tau217⁺EV分泌下降，敲低HSPA8能够显著恢复p-tau217⁺EV的分泌水平，证实HSPA8负向调控p-tau217⁺EV释放。机制上的进一步探索发现AD中异常升高的HSPA8通过促进SNAP29-Aβ结合、破坏SNARE复合体组装，导致p-tau217⁺EV分泌受损。

HSPA8是调节p-tau217相关EV的上游信号分子

3、抑制HSPA8可改善认知并恢复p-tau217⁺EV分泌

为进一步研究HSPA8在p-tau217⁺EV合成/分泌和AD进展中的作用，研究团队将AAV-shHSPA8立体定向注射到6月龄APP/PS1小鼠的海马中，检测发现HSPA8敲低可缓解APP/PS1小鼠的认知缺陷。纳米流式检测小鼠血浆，APP/PS1小鼠p-tau217⁺EV占比呈下降趋势，海马敲低HSPA8可逆转该下降，恢复血浆p-tau217⁺EV水平。海马组织免疫荧光结果显示，sh-HSPA8组相较于对照组，Aβ-SNAP29共定位显著减弱，HSPA8-SNAP29共定位回升，在体内重现体外分子机制。这些发现表明，HSPA8抑制不仅改善APP/PS1小鼠的认知功能障碍，而且恢复了p-tau217⁺EV的合成和分泌。研究基于HSPA8与SNAP29的结合位点，设计合成SNAP29来源25-mer竞争性抑制肽，用于阻断HSPA8介导的Aβ-SNAP29异常相互作用，证实靶向HSPA8的25-mer多肽可竞争性阻断Aβ-SNAP29异常结合，恢复p-tau217⁺EV分泌，减轻tau病理，改善AD模型小鼠认知缺陷，具备AD干预潜力。

HSPA8下调恢复APP/PS1小鼠的认知功能和p-tau217⁺EV分泌

研究结论

本研究确定HSPA8是神经元分泌p-tau217⁺EV的关键调控因子，并揭示了其在AD神经元中的异常升高。上调的HSPA8通过改变SNAP29–Aβ相互作用损害SNARE复合体形成，减少p-tau217⁺EV释放并加重AD病理。靶向HSPA8的治疗可恢复EV分泌并改善认知，为AD干预提供了有前景的新途径。

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