服务介绍

基因沉默是基因表达调控的一种重要方式。它主要表现为特定基因的表达量下调或表达抑制。基因沉默主要包括两方面：转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默。前者主要由基因甲基化、异染色质化和位置效应等引起；后者由反义RNA和RNA干扰等引起。其中，RNA干扰技术凭借高效、特异的靶基因抑制在后基因组时代的基因功能研究和药物开发中显示了巨大的应用前景。它是一种由双链RNA诱发的同源基因表达沉默的现象。在RNA干扰实验中，由于siRNA所介导的基因沉默效率难以预料，因此，高效siRNA的选择对于成功沉默或关闭基因表达是非常关键的。无论是特异siRNA沉默效果的检测，还是高效siRNA的筛选，科研工作者均需要通过生物实验手段来验证。维真生物可以根据您的实验需求提供个性化的基因沉默效果检测服务。

服务内容

维真生物可为客户提供特异shRNA沉默效果检测和高效shRNA筛选服务，具体信息详见下表:

*如您对上述shRNA沉默检测服务感兴趣，请您点击“欢迎垂询”留下您的信息，我们将为您提供具体实验方案和项目价格。

没有合适目的细胞进行高效shRNA筛选，怎么办？

科研工作者在做鼠源基因RNA干扰实验时通常会遇到一个问题：没有合适的目的细胞进行高效shRNA筛选，怎么办呢？若没有参考高效靶点，科研工作者通常会针对一个靶基因设计3-4条shRNAs。为了体外验证shRNAs的特异性和高效性，我们可以将shRNAs质粒和靶基因的过表达质粒共同转染HEK293细胞，通过分子生物学手段检测靶基因的沉默表达情况。

服务流程

相关资料

质粒转染试剂说明书

siRNA干扰效率的影响因素

1. shRNA载体元件：比如loop环、shRNA的热力学稳定性；

2. 靶基因性质：比如靶基因二级结构、靶基因微环境；

3. 实验体系：比如靶细胞(原代细胞)，转染效率会比较低，选择维真生物的病毒产品或病毒包装服务可以解决此问题；转染时间的控制，健康状态的细胞有利于提高转染效率；观察时间的控制，观察时间取决于靶蛋白的半衰期；转染试剂和转染步骤，也会影响转染效率；

4. shRNA的脱靶性；

5. 生物体内蛋白表达补偿途径的存在。